制備液相色譜儀是一種常用的色譜儀產(chǎn)品,主要由儲(chǔ)液器、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成,被廣泛用于多個(gè)領(lǐng)域中。液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動(dòng)相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。
反相色譜的流動(dòng)相通常以水為基礎(chǔ),然后加入一定量的水溶極性調(diào)節(jié)劑,如甲醇,乙腈,四氫呋喃等,極性調(diào)節(jié)劑的性質(zhì)和比例對(duì)溶質(zhì)的保留和分離選擇性有顯著影響。一般來說,甲醇-水體系可以滿足大多數(shù)樣品的分離要求,流動(dòng)相因其粘度低、價(jià)格低廉而成為反相色譜常用的流動(dòng)相。
液相色譜儀的記錄樣品通過檢測(cè)器吸光度變化引起的電信號(hào)變化,從而產(chǎn)生色譜圖,結(jié)果取決于后期色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)的數(shù)據(jù)處理。以下是兩種常用的液相色譜儀數(shù)據(jù)處理方法。
光譜處理后可以制作校正曲線。校正曲線是數(shù)據(jù)處理的難點(diǎn)。它是一個(gè)標(biāo)準(zhǔn),使信息和數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)光譜圖處理樣品光譜圖。液相色譜儀的校正是通過分析制備的標(biāo)準(zhǔn)樣品來確定計(jì)算組分濃度的響應(yīng)系數(shù)的過程。
內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)方法是將標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作為要求的內(nèi)部條件,并以合適的操作條件對(duì)樣品進(jìn)行嚴(yán)格的試驗(yàn)和試驗(yàn)結(jié)果的檢驗(yàn),但對(duì)樣品的準(zhǔn)確操作條件和試驗(yàn)結(jié)果的分析要是嚴(yán)格的,而對(duì)樣品的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)則不需要對(duì)樣品進(jìn)行嚴(yán)格的校正。